Poster Session

Calcium Channel Blocker, Nifedipine, Inhibits MCP-1 Expression in Injured Artery via Inhibition of NF-κB

ニフェジピンの抗炎症作用の機序−傷害動脈におけるNF-κBを介するMCP-1の発現を抑制

愛媛大学大学院医学系研究科分子心血管生物・薬理学分野
Xinyu Gao 氏

単球遊走促進蛋白（MCP）-1は、傷害動脈における炎症反応の発現機序において中心的な役割を担うことが示唆されている。Gao 氏らは、MCP-1の発現におけるCa拮抗薬ニフェジピンの作用機序を解明するために、MCP-1の調節におけるNF-κB（免疫反応を強める遺伝子のスイッチの役割をする転写因子）の役割について検討し、これまで明確ではなかったニフェジピンの抗炎症作用の機序を示唆する知見を得た。

MCP-1の発現と核、細胞質のNF-κB、IκBレベルを測定

10〜12週齢の雄C57BL/6 マウスを用いて、大腿動脈周囲にカフを留置することで炎症性の血管傷害を作製した。投与するニフェジピンは血圧に影響を及ぼさない量とし、浸透圧ポンプを用いて腹腔内投与した。新生内膜形成は形態計測学的に測定し、細胞増殖は増殖性細胞核抗原（PCNA）のポジティブ染色法にて測定した。

MCP-1 mRNAの発現は定量的real-time RT-PCR 法で、核および細胞質におけるNF-κB、IκB（NF-κB の負の制御因子）のレベルはウェスタンブロット法で測定した。NF-κBのDNA 結合活性は電気泳動移動度シフト解析にて検討した。

カフ留置およびニフェジピン投与開始後5日目に細胞質、核のNF-κBレベル、NF-κB DNA 結合活性、細胞質IκB レベルを測定し、7日目に細胞増殖、MCP-1発現、14日目に新生内膜形成を測定した。ニフェジピンは14日間投与し、血圧はtail-cuff法にて測定した。

NF-κB活性化の抑制を介してMCP-1発現を抑制

ニフェジピンにより、カフ留置後の傷害動脈におけるMCP-1発現の増大が有意に抑制された。また、血管平滑筋細胞の新生内膜形成および増殖の抑制がみられた。血圧の有意な変動は認められなかった。カフ留置後の傷害動脈では細胞質中のNF-κB発現量が減少したが、核では増加していた。一方、IκBの発現量は傷害動脈の細胞質で有意に減少していた。

ニフェジピンは傷害動脈において細胞質IκBの減少を抑制、核および細胞質におけるNF-κBの活性化を抑制した。

Gao 氏はこれらの知見から、炎症性の傷害損傷におけるMCP-1発現の増大は、NF-κBの活性化およびIκBの分解によることを示唆するものであり、また「ニフェジピンはNF-κB活性化の抑制を介して、傷害動脈のMCP-1発現を抑制すると考えられる」と結論した。